產(chǎn)品詳情
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色譜柱使用經(jīng)驗
色譜柱在使用前，進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是zui佳條件)，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。
1、樣品的前處理：a、使用流動相溶解樣品。b、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。 c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
2、流動相的配制：液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：a、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。b、流動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。c、流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制。e、流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實驗無法進行。f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
注意：a.由于甲醇廉價，對于反相柱推薦使用甲醇體系(必須使用乙jing的場合除外)。 b.對于正相柱推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或提純后的己烷作流動相，沒有提純的己烷不得使用。用水使用超純水(電阻率大于18兆歐)，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果。c.含水流動相最*在實驗前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動相不要過夜。加入疊dan化na，防止細菌生長。d.流動相要求使用0.45 μm濾膜過濾，除去微粒雜質(zhì)。e.使用HPLC級溶劑配制流動相，使用合適的流動相可延長色譜柱的使用壽命，提高柱性能。
沖柱子的目的只要是有機溶劑就行，不過黏度不要太大，因為有機溶劑能夠防止細菌生長，沖柱子的目的就是為了防止細菌生長堵塞儀器系統(tǒng)和柱子。一般甲醇和乙jing相互沖洗是沒有問題的，但乙jing要比甲醇價格貴的 。
保留時間變化的原因
柱頭塌陷在使用過程中，填料下沉，在柱子進口處出現(xiàn)一個小空間，使得分離效果不良。
補救方法：卸開柱頭螺絲，找一點同類填料，用甲醇濕潤后，添在柱子上，反復(fù)幾次。然后裝上螺絲，用溶劑沖洗1-2小時，使之平衡。
小結(jié)正確使用緩沖鹽很有必要，既可以防止緩沖鹽析出，也可以達到提高色譜柱使用壽命的目的。我們不妨用一句話來總結(jié)它的使用方法：用前要過濾，用后需沖洗。（來源實驗與分析）
