產(chǎn)品詳情
人EB病毒檢測(cè)試劑盒_eb早期抗原IgM檢測(cè)試劑盒_EB病毒IgM抗體試劑盒_eb病毒定性檢測(cè)
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【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：人EB病毒早期抗原IgM抗體(EBV EA IgM)定性檢測(cè)試劑盒（ELISA）
英文名稱：Human EBV EA IgM ELISA KIT
【包裝規(guī)格】
48人份/盒，96人份/盒
【預(yù)期用途】
僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中是否含有人EB病毒早期抗原IgM抗體。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被人EB病毒早期抗原IgM抗體抗原（固相抗原，貨號(hào)：INS1021003C）的微孔酶標(biāo)板中，加入人EB病毒早期抗原IgM抗體陰陽(yáng)性性對(duì)照（貨號(hào)：INS1021003J）和待測(cè)樣本，溫育洗滌，再加入另一株HRP標(biāo)記的抗人EB病毒早期抗原IgM抗體抗體（酶標(biāo)抗體，貨號(hào)：INS1021003E），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗體-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中人EB病毒早期抗原IgM抗體的濃度正相關(guān)，通過計(jì)算公式判斷樣品陰陽(yáng)性。
【檢驗(yàn)方法】
試劑準(zhǔn)備
1、使用前，所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫2h，確保充分復(fù)溫到室溫。
2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1體積充分混合，混合后15分鐘內(nèi)使用。
操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照孔、樣本孔，陰陽(yáng)性對(duì)照孔各加對(duì)照品50μL，樣本孔加樣本50μL。
5、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
6、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
7、所有孔加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
8、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
8、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
檢測(cè)完成后，以陰性對(duì)照的OD+0.25，做為閾值，樣本OD值大于閾值，為陽(yáng)性；樣本OD值低于閾值為陰性。
